PSA secretion and cell proliferation are affected by NCoR1 silencing in prostate cancer cells

Introduction: The androgen receptor (AR) plays an important role in normal development of the prostate gland, as well as in prostatic neoplasms. Transcriptional regulation by AR is modulated by its interaction with co-activators or co-repressors, such as NCoR1 (nuclear receptor co-repressor 1), which is involved in reducing AR activity over the target gene transcription. Methods: To identify the role of NCoR1 in the prostate cancer androgen independence in a cell line model, we aimed to evaluate the effects of silencing NCoR1 on prostate-specific antigen (PSA) gene expression, the proliferative response and PSA secretion on the supernatant of C4-2B and LNCaP cells that were submitted to small interfering RNAs (siRNAs) transfection, and to treatments with different androgen dosages. Results: In LNCaP and C4-2B cells with no dihydrotestosterone (DHT) treatment, a decrease in PSA mRNA expression was observed 48 hours and 72 hours after gene silencing in the siNCoR group when compared to the control and siNC groups. The LNCaP and C4-2B cells showed a biphasic pattern in response to dihydrotestosterone treatment in transfected groups (siNCoR and siNC) as well as in the control condition (without transfection). The secretion of PSA in cell supernatant of LNCaP and C4-2B cells was higher in the siNCoR group, and, in relation to hormonal treatment, higher in the 10-8 M DHT group. Conclusions: A reduction in the NCoR1 levels seems to have a double influence on the activity of AR in PCa cells. These results suggest that NCoR may act as an AR co-repressor depending upon hormonal stimulation.(AU)

Androgen receptor CAG polymorphism and the risk of benign prostatic hyperplasia in a Brazilian population

Benign prostatic hyperplasia (BPH) is a very frequent age-related proliferative abnormality in men. Polymorphic CAG repeat in the androgen receptor (AR) can alter transactivation of androgen-responsive genes and potentially influence BPH risk. We investigated the association between CAG repeat length and risk of BPH in a case-control study of a Brazilian population. We evaluated 214 patients; 126 with BPH and 88 healthy controls. DNA was extracted from peripheral leucocytes and the AR gene was analyzed using fragment analysis. Hazard ratio (HR) and 95% confidence interval were estimated using logistic regression models. Mean CAG length was not different between patients with BPH and controls. The CAG repeat length was examined as a categorical variable (CAG < 21 vs. CAG > 21 and CAG < 22 vs. CAG > 22) and did not differ between the control vs. the BPH group. We found no evidence for an association between AR CAG repeat length in BPH risk in a population-based sample of Brazilians.

Insulin stimulation of Akt/PKB phosphorylation in the placenta of preeclampsia patients / Estimulação com insulina da fosforilação da Akt/PKB em placenta de pacientes com pré-eclâmpsia

CONTEXT AND OBJECTIVE: Preeclampsia is a multi-systemic disease and one of the most frequent severe health problems during pregnancy. Binding of insulin triggers phosphorylation and activates cytoplasmic substrates such as phosphatidylinositol 3 kinase (PI3K). Phosphorylation of membrane phosphoinositide 2 (PIP2) to phosphoinositide 3 (PIP3) by PI3K starts Akt/PKB activation. Defects in phosphorylation of the insulin receptor and its substrates have an important role in insulin resistance. Studies have shown that insulin resistance is associated with preeclampsia and its pathophysiology. The aim here was to investigate insulin stimulation of the Akt/PKB pathway in the placenta, in normal and preeclampsia parturients. DESIGN AND SETTING: Cross-sectional study in a tertiary public university hospital. METHODS: Placentas were collected from 12 normal and 12 preeclampsia patients. These were stimulated and analyzed using Western blot to quantify the Akt/PKB phosphorylation. RESULTS: The insulin stimulation was confirmed through comparing the stimulated group (1.14 ± 0.10) with the non-stimulated group (0.91 ± 0.08; P < 0.001). The phosphorylation of Akt/PKB did not differ between the placenta of the normal patients (1.26 ± 0.16) and those of the preeclampsia patients (1.01 ± 0.11; P = 0.237). CONCLUSIONS: In vitro insulin stimulation of the human placenta has been well established. There was no difference in Akt/PKB phosphorylation, after stimulation with insulin, between placentas of normal and preeclampsia patients. Nevertheless, it cannot be ruled out that the Akt/PKB signaling pathway may have a role in the pathophysiology of preeclampsia, since the substrates of Akt/PKB still need to be investigated.

CONTEXTO E OBJETIVO: Pré-eclâmpsia (PE) é uma doença multissistêmica das mais frequentes e graves durante a gestação. A ligação da insulina inicia a fosforilação e ativação de substratos citoplasmáticos, tais como fosfatidil-inositol 3 quinase (PI3K). A fosforilação do fosfoinositol 2 (PIP2) da membrana em fosfoinosiltol 3 (PIP3) pela PI3K inicia a ativação da Akt/PKB. Defeitos na fosforilação do receptor de insulina e seus substratos têm papel importante na resistência à insulina. Estudos demonstraram que resistência à insulina está associada com pré-eclâmpsia e sua patofisiologia. O objetivo foi investigar a via de estimulação com insulina da Akt/PKB em placenta de parturientes normais e com pré-eclampsia. TIPO DE ESTUDO E LOCAL: Estudo do tipo transversal em um hospital universitário público de nível terciário. MÉTODOS: Vinte e quatro placentas (12 normais, 12 com PE) foram coletadas, estimuladas e analisadas por Western blot para quantificar a fosforilação da Akt/PKB. RESULTADOS: A estimulação com insulina foi confirmada comparando os grupos estimulados (1,14 ± 0,10) e não estimulados (0.91 ± 0.08; P < 0.001). A fosforilação de Akt/PKB não foi diferente na placenta de pacientes normais (1,26 ± 0,16) e com PE (1,01 ± 0,11; P = 0,237). CONCLUSÕES: A estimulação in vitro da placenta humana com insulina foi bem estabelecida. Não houve diferença na fosforilação da Akt/PKB após estimulação em placentas de pacientes normais e PE. Contudo, não é possível descartar a participação desta via de sinalização na patofisiologia da PE, uma vez que os substratos da Akt/PKB ainda precisam ser investigados.

Hormônio anti-mulleriano: um marcador mais fidedigno da reserva ovariana? / Anti-mullerian hormone: a better marker of ovarian reserve?

O Hormônio anti-mulleriano (HAM) é uma glicoproteína dimérica, membro da super família TGF (transforming growth factor), descoberto em 1947 por Alfred Jost. Além da produção de HAM pelas células de Sertoli testiculares, as células da granulosa dos folículos ovarianos sintetizam HAM em discretas quantidades a partir de 32 semanas de vida intra-uterina, com níveis séricos variáveis ao longo da vida reprodutiva. O HAM parece ter ação regulatória no desenvolvimento folicular com ação inibitória sobre o crescimento de folículos primordiais e crescimento folicular induzido pelo FSH. Por estas razões, acredita-se que o HAM tenha relação direta com o pool folicular apontando como novo marcador de reserva ovariana. Foi realizada revisão na literatura dos principais estudos sobre o HAM e suas implicações na regulação do desenvolvimento folicular, marcador de reserva ovariana, preditor de desfecho em ciclos de fertilização in vitro e de ocorrência da menopausa, associação com amenorréia secundária e neoplasias. O HAM parece ser um marcador mais fiel e fidedigno para avaliação da reserva ovariana, sendo melhor do que o FSH e Inibina B e correlacionando-se com a contagem de folículos antrais, apesar de ainda dispormos de poucos estudos para abordarmos sua dosagem como rotina.

Biologia molecular do câncer cervical / Molecular biology of cervical cancer

A carcinogênese é um processo de múltiplas etapas. Alterações no equilíbrio citogenético ocorrem na transformação do epitélio normal a câncer cervical. Numerosos estudos apoiam a hipótese de que a infecção por HPV está associada com o desenvolvimento de alterações malignas e pré-malignas do trato genital inferior. Neste trabalho são apresentadas as bases para a compreensão da oncogênese cervical. O ciclo celular é controlado por proto-oncogenes e genes supressores. Quando ocorrem mutações, proto-oncogenes tornam-se oncogenes, que são carcinogênicos e causam multiplicação celular excessiva. A perda da ação de genes supressores funcionais pode levar a célula ao crescimento inadequado. O ciclo celular também pode ser alterado pela ação de vírus, entre eles o HPV (Human Papiloma Virus), de especial interesse na oncogênese cervical. Os tipos de HPV 16 e 18 são os de maior interesse, freqüentemente associados a câncer cervical e anal. O conhecimento das bases moleculares que estão envolvidas na oncogênese cervical tem sido possível devido a utilização de técnicas avançadas de biologia molecular. A associação destas técnicas aos métodos diagnósticos clássicos, poderão levar a uma melhor avaliação das neoplasias cervicais e auxiliar no desenvolvimento de novas terapias, talvez menos invasivas e mais efetivas.

Carcinogenesis involves several steps. Disorders of the cytogenetic balance occur during the evolution from normal epithelium to cervical cancer. Several studies support the hypothesis that the Human Papiloma Virus (HPV) infection is associated to development of premalignant and malignant lesions of cervical cancer. In this review we show the basis to understand cervical oncogenesis. The cell cycle is controlled by protooncogenes and supressive genes. This orchestrated cell cycle can be affected by virus such as HPV. Of special interest in the cervical carcinogenesis are the HPV subtypes 16 and 18. How HPV immortalizes cervical cells is not fully understood. Advances have been made in the application of molecular biology techniques in the understanding of this mechanism. Once established, these techniques will lead to a better assessment of cervical neoplasias and help the development of new therapies, hopefully less invasive and more effective.

Biologia molecular das neoplasias de próstata / Molecular biology in the prostate neoplasia

O câncer de próstata (CP) é uma das principais causas de doença e morte, representando no Brasil a segunda causa de óbitos por câncer em homens. A hiperplasia prostática benigna (HPB) é uma doença progressiva de alta prevalência, com evidências histológicas em 50 por cento dos homens aos 50 anos e 90 por cento aos 80 anos de idade. A patogênese das neoplasias prostáticas tem sido associada à ação dos androgênios e a seu receptor nuclear específico, embora os mecanismos moleculares que envolvem os processos de proliferação, diferenciação e apoptose não estejam bem estabelecidos, assim como os mecanismos de transformação neoplásica e carcinogênese. Co-ativadores e co-repressores podem também contribuir para a carcinogênese prostática, ligando-se diretamente aos receptores nucleares, recrutando proteínas adicionais e interagindo com a maquinaria transcricional para aumentar a transcrição de genes-alvo. Polimorfismos do receptor de androgênios e da 5alfa redutase tipo 2 foram identificados e poderiam estar associados com risco para CP. Genes reguladores do ciclo celular e da apoptose, bem como fatores de crescimento, também participam de processos relacionados com a tumorigênese prostática. Assim, alterações no padrão da expressão gênica do tecido normal podem levar ao desenvolvimento do fenótipo maligno e potencialmente estes genes podem servir como marcadores de prognóstico. Com o advento de novas tecnologias moleculares, o número de genes marcadores potenciais para o CP cresce dia a dia, mas os dados atuais requerem ainda validação com maior número de amostras e correlação com o processo da doença. Trazê-los do ambiente de laboratório para o uso clínico requer uma análise rigorosa e há, portanto, um longo caminho ainda a percorrer.